响应葡萄根瘤蚜侵染的扩展蛋白基因筛选及其多克隆抗体的制备

• 作者: 季兴龙 杜远鹏 翟衡 韩宁
• 来源期刊: 园艺学报
• 学科: 农学
• 关键词: 葡萄 根瘤蚜 扩展蛋白 VvEXPA1 多克隆抗体制备
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 果树
• 页码范围: 15-24
• 分类号: S663.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.16420/j.issn.0513-353x.2015-0574

摘要

以对葡萄根瘤蚜敏感的‘克瑞森无核’葡萄(Vitis vinifera‘Crimson Seedless’)组培苗和抗性砧木‘1103P’组培苗为试材,通过荧光定量PCR技术从扩展蛋白基因家族中筛选到经根瘤蚜侵染后表达上调的扩展蛋白基因家族成员VvEXPA1.采用RT-PCR方法克隆到VvEXPA1基因片段,连接至原核表达载体pET-32a中,转化大肠杆菌DE3菌株,测序确定构建的重组载体pET3 2a-VvEXPA1开放阅读框正确,并经IPTG诱导表达了融合蛋白.该蛋白以包涵体的形式存在,纯化后免疫新西兰兔,制备扩展蛋白多克隆抗体,通过Western-blot和ELISA检测抗体的特异性及效价.结果显示制备的抗体具有较高的特异性,ELISA显示效价为1∶51 200.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杜远鹏	山东农业大学园艺科学与工程学院作物生物学国家重点实验室	81	537	13.0	21.0
2	翟衡	山东农业大学园艺科学与工程学院作物生物学国家重点实验室	194	3463	31.0	51.0
3	韩宁	齐鲁工业大学生物工程学院	6	23	3.0	4.0
4	季兴龙	山东农业大学园艺科学与工程学院作物生物学国家重点实验室	4	24	3.0	4.0