一种几丁质酶基因的克隆表达及酶解产物分析

• 作者: 孙淼 李美玉 王晓辉 肖景惠
• 来源期刊: 微生物学通报
• 关键词: 几丁质酶 基因克隆 原核表达 纯化 几丁寡糖
• 年，卷（期）: 2016,（10）
• 所属期刊栏目: 基因克隆及功能研究
• 页码范围: 2179-2186
• 语种: 中文
• DOI: 10.13344/j.microbiol.china.150851

摘要

[目的]克隆耐冷菌假交替单胞菌(Pseudoalteromonas sp.DL-6)的几丁质酶基因并进行原核表达,纯化重组蛋白并研究其酶解产物.[方法]采用PCR扩增法从Pseudoalteromonas sp.DL-6中克隆几丁质酶基因(chiA),连接到表达载体pET28a,导入Escherichia coli BL21(DE3)进行诱导表达.SDS-PAGE检测几丁质酶ChiA的分子量与纯度,4-甲基伞形酮荧光底物4MU-(GlcNAc)2测定酶活,电喷雾质谱(ESI-MS)检测酶解产物.[结果]chiA基因(GenBank登录号KF234015)在大肠杆菌中高效表达,Ni-NTA亲和层析柱纯化几丁质酶ChiA的总活力可达168.68 U.ESI-MS检测结果表明重组蛋白酶解1％胶体几丁质的产物为几丁寡糖.[结论]利用内切几丁质酶ChiA水解几丁质生产几丁寡糖,为其在食品、医药和农业等领域的潜在应用提供有利参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王晓辉	大连大学生命科学与技术学院	31	177	5.0	13.0
2	孙淼	大连大学生命科学与技术学院	7	3	1.0	1.0
3	李美玉	大连大学生命科学与技术学院	2	8	2.0	2.0
4	肖景惠	大连大学生命科学与技术学院	4	5	1.0	2.0