表达hCD4和hCCR5基因的慢病毒载体的构建

• 作者: 何金洋 曾常春 李雅婧 梁娟 诸葛福艳 谭宁
• 来源期刊: 华夏医学
• 学科: 医学
• 关键词: 慢病毒载体 hCD4/hCCR5 质粒 基因表达
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 6-11
• 页数: 6页
• 分类号: R318
• 字数: 3180字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19296/j.cnki.1008-2409.2016-05-002

摘要

目的:构建一种高效转染hCD4和hCCR5基因的慢病毒载体.方法:应用Gateway技术构建可表达hCD4和hCCR5的质粒载体PLA.ExBi.P/puro-CMV-CD4-IRES-CCR5,并进行酶切和测序鉴定,进行慢病毒包装,用qRT-PCR方法检测293T细胞中hCD4/CCR5的mRNA表达.将本慢病毒载体转染于小鼠白血病细胞L615,应用qRT-PCR检测细胞内hCD4/CCR5 mRNA的表达及对HIV-1的易感性.结果:成功构建PLA.ExBi.P/puro-CMV-CD4-IRES-CCR5质粒表达载体,包装成的慢病毒载体在293T细胞中具有hCD4/CCR5 mRNA水平的高表达(P＜0.05);转染于L615细胞亦表现出hCD4/CCR5 mRNA水平的高表达(P＜0.05),并具备了HIV-1入胞感染的特点.结论:成功建立hCD4和hCCR5基因双启动的慢病毒载体,可使目的细胞高效表达hCD4及hCCR5分子,对HIV-1宿主细胞的制备、HIV/AIDS的发病机制和抗病毒研究具有积极的意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谭宁	桂林医学院广西肝脏损伤与修复分子医学重点实验室	42	148	7.0	10.0
2	何金洋	广州中医药大学热带医学研究所	59	480	11.0	20.0
3	曾常春	桂林医学院生物技术学院	6	18	3.0	4.0
4	梁娟	桂林医学院生物技术学院	4	1	1.0	1.0
5	李雅婧	桂林医学院生物技术学院	3	1	1.0	1.0
6	诸葛福艳	中山大学生命科学院	2	1	1.0	1.0