中华根瘤菌NP1亚硝酸盐还原酶基因的表达和酶学性质研究

• 作者: 张宇 袁会兰 许雷 边晨凯 陈度宇
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 中华根瘤菌 亚硝酸盐还原酶 原核表达 NO2-生物清除
• 年，卷（期）: 2016,（11）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 132-134,164
• 页数: 4页
• 分类号: Q812
• 字数: 3351字
• 语种: 中文

摘要

[目的]研究中华根瘤菌NP1(Sinorhizobium sp.NP1)中亚硝酸盐还原酶基因(nir)的原核表达情况以及粗酶液的化学性质.[方法]构建该基因的原核表达载体pET32a-nir,然后对重组蛋白质进行SDS-PAGE和Western blotting分析获得NIR酶在原核生物中的表达情况.通过测定粗酶液对亚硝酸盐降解情况研究相关酶学性质.[结果]SDS-PAGE检测结果表明,可溶性融合表达产物约为57 ku,其中亚硝酸盐还原酶大小约40 ku,与酶分子量的预估值一致;Western blotting证实该蛋白可与根据亚硝酸盐还原酶合成的多克隆抗体发生强阳性反应;酶学性质分析表明,亚硝酸盐还原酶活力约为247.15 U/mL,最适pH 6.5,最适反应温度37℃,该酶对NaCl的耐受性为0.3 mol/L.[结论]亚硝酸盐还原酶蛋白重组质粒能在大肠杆菌系统中高效表达,研究其酶学性质为NO2-生物清除提供了技术保障.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许雷		17	151	6.0	12.0
2	张宇		37	163	8.0	12.0
3	袁会兰		1	1	1.0	1.0
4	边晨凯		3	1	1.0	1.0
5	陈度宇		5	1	1.0	1.0