羊口疮病毒陕西分离株B2L基因的克隆、序列分析及原核表达

• 作者: 付明哲 何亚鹏 庞文静 张琪 徐丽美 许信刚
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 羊口疮病毒 B2L基因 克隆 序列分析 原核表达
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 19-23
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.1
• 字数: 3918字
• 语种: 中文

摘要

为了对羊口疮病毒（ORFV ）陕西分离株B2 L 基因进行克隆、序列分析及原核表达，根据Gen-Bank 已登录的 ORFV（JN565694．1）B2L 基因序列，设计合成一对特异性引物，应用 PCR 技术扩增 ORFV B2L 基因，并将目的基因连接到原核表达载体 pET-28a 中，成功构建重组质粒 PET28a-B2L，转化大肠埃希菌 BL21感受态细胞进行诱导表达，并进行 SDS-PAGE 和 Western blot 分析。结果表明，成功克隆了 OR-FV 陕西分离株 B2L 全基因序列，核苷酸序列分析表明，陕西分离株 B2L 基因与国内外已报道的 ORFV 毒株核苷酸同源性超过97．3％，氨基酸同源性超过95．0％。重组菌经 IPTG 诱导后成功表达分子质量约为42 ku 的重组蛋白，该蛋白能与羊口疮阳性血清特异性结合，具有良好的反应原性。研究结果为 ORFV 的分子生物学特性研究提供资料，为进一步研制 ORFV 单克隆抗体及抗体检测 ELISA 试剂盒奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许信刚	西北农林科技大学动物医学院	116	501	10.0	14.0
2	张琪	西北农林科技大学动物医学院	75	218	9.0	11.0
3	付明哲	西北农林科技大学动物医学院	94	346	10.0	14.0
4	徐丽美	西北农林科技大学动物医学院	5	4	1.0	2.0
5	何亚鹏	西北农林科技大学动物医学院	20	41	4.0	5.0
6	庞文静	西北农林科技大学动物医学院	8	16	3.0	3.0