受磷蛋白重组腺病毒的制备与鉴定

• 作者: 任安经 刘梦娜 吕建新 汪凯 章卫平
• 来源期刊: 医学研究杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 受磷蛋白 腺病毒 心肌 肌质网
• 年，卷（期）: 2016,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 48-53
• 页数: 6页
• 分类号: R3
• 字数: 4597字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11969/j.issn.1673-548X.2016.10.012

摘要

目的 构建含受磷蛋白PLB基因的重组腺病毒载体,为研究受磷蛋白PLB的生物学功能提供工具.方法 将RT-PCR获得的受磷蛋白PLB cDNA克隆至pShuttle-CMV载体,Pme Ⅰ酶切线性化后,电转化至含有腺病毒骨架质粒的大肠杆菌BJ5183中进行同源重组,从而获得重组腺病毒载体,Pac Ⅰ酶线性化该重组载体,转染293细胞进行病毒的包装和扩增,经超离心对重组病毒Ad-PLB进行纯化;测定病毒效价后,体外感染大鼠心肌细胞H9C2,Western blot法验证腺病毒病毒介导的重组PLB蛋白表达.结果 成功构建了重组腺病毒载体,体外包装制备了PLB的重组腺病毒,扩增纯化后的病毒效价达6.25×1010/ml,能有效介导PLB在心肌细胞中的重组表达.结论 过表达受磷蛋白PLB的重组腺病毒载体构建成功,为之后受磷蛋白PLB的相关生物学功能研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	章卫平	第二军医大学基础部病理生理学教研室	106	446	11.0	15.0
2	任安经	第二军医大学基础部病理生理学教研室	32	160	7.0	10.0
3	汪凯	第二军医大学基础部病理生理学教研室	11	43	4.0	6.0