人工合成小分子双链RNA通过激活P21蛋白对膀胱癌细胞生长的影响

• 作者: 叶章群 张庆松 杨为民 汪成合 盖强强 陈忠
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 关键词: 膀胱肿瘤 RNA,双链 微RNAs p21 RNA激活
• 年，卷（期）: 2016,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 812-816
• 页数: 5页
• 字数: 3355字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2016.10.013

摘要

目的 通过转染人工合成的小分子双链RNA(dsRNA) dsP21-555至膀胱癌细胞系T24和EJ,观察其对膀胱癌细胞生长的作用.方法 根据对膀胱癌细胞的不同处理分为3组:阴性对照组[转染随机序列(dsControl)],阳性对照组(转染相应的微小RNA即miR-370)和实验组(转染dsP21-555).实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测3组细胞p21 mRNA及细胞周期依赖性激酶(CDK)4、CDK-6 mRNA的表达;Western印迹法检测P21蛋白和CDK4、CDK6蛋白的表达;流式细胞术测定转染后细胞周期分布;细胞增殖实验检测转染后细胞增殖能力;集落形成实验检测单个细胞克隆增殖能力.结果 qPCR结果显示,与转染dsControl相比,转染dsP21-555分别上调T24和EJ细胞中p21 mRNA表达至2.46倍(P＜0.01)和2.60倍(P＜0.01);转染dsP21-555与转染miR-370相比,p21 mRNA表达差异无统计学意义(均P＞0.05).与转染dsControl相比,转染dsP21-555分别使T24和EJ细胞中CDK4 mRNA的表达下调43％ (P ＜0.01)和54％(均P＜0.01),CDK6 mRNA的表达下调39％ (P＜0.01)和36％(P＜0.01);转染dsP21-555与转染miR-370相比,CDK4、CDK6 mRNA的表达差异无统计学意义(P＞0.05).Western蛋白印迹检测结果验证了组间p21和CDK4、6基因表达的差异.流式细胞术检测显示,与转染dsControl相比,转染miR-370或dsP21-555后,G0/G1期细胞比例明显升高,而S期和G2/M期细胞比例减少,细胞周期被阻滞在G0/G1期.细胞增殖实验结果显示,与转染dsControl相比,转染miR-370或dsP21-555后细胞增殖能力明显下降(均P＜0.05),且转染miR-370与转染dsP21-555间细胞增殖能力差异无统计学意义(P＞0.05).细胞集落形成实验显示,转染miR-370和dsP21-555形成的集落数量均较转染dsControl少.结论 dsP21-555能通过RNA激活作用激活P21蛋白的表达并显著抑制膀胱癌细胞的生长.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨为民	华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科湖北省泌尿外科研究所	226	1320	17.0	26.0
2	陈忠	华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科湖北省泌尿外科研究所	111	650	12.0	22.0
3	张庆松	华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科湖北省泌尿外科研究所	5	22	2.0	4.0
4	盖强强	华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科湖北省泌尿外科研究所	5	11	2.0	3.0
5	汪成合	上海交通大学附属第六人民医院泌尿外科	2	9	1.0	2.0