甘草SRAP-PCR正交试验设计优化及引物筛选

• 作者: 艾鹏飞 苏姗 靳占忠
• 来源期刊: 河北工业科技
• 学科: 生物学
• 关键词: 植物遗传学 甘草 SRAP PCR 正交试验设计 引物筛选
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 研究与开发
• 页码范围: 7-11
• 页数: 5页
• 分类号: Q37
• 字数: 3080字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7535/hbgykj.2017yx01002

摘要

为了建立甘草SRAP技术,采用四因素(Taq酶,Mg2+,dNTP,引物)四水平的正交试验设计[L16(44)]对甘草进行SRAP-PCR试验,电泳结果采用软件SPSS分析,退火温度和引物筛选采用单因子试验.结果发现,4种因素对甘草SRAP-PCR的影响依次为dNTP>Taq酶>Mg2+>引物;优化后的甘草SRAP-PCR体系(20μL)为1×PCR缓冲液,引物0.6μmol/L,Mg2+2.5mmol/L,Taq酶1.5U,dNTP0.3mmol/L,模板DNA40ng;最佳的退火温度为50℃;81对引物中有22对扩增出明亮、清晰的谱带.该优化的SRAP-PCR反应体系为进行甘草资源遗传分析提供了技术支持.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	靳占忠	河北科技大学生物科学与工程学院	39	246	9.0	14.0
2	艾鹏飞	河北科技大学生物科学与工程学院	25	171	7.0	11.0
3	苏姗	河北科技大学生物科学与工程学院	2	16	2.0	2.0