Pri-miRNA21/23a重组病毒载体的构建及其在肝细胞中的表达鉴定

• 作者: 任晓虎 刘建军 卢维雪 张航 胡盼盼 钟佳成
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: microRNA miR-21 miR-23a 慢病毒表达载体
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 756-761,767
• 页数: 7页
• 分类号: Q78
• 字数: 4200字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2017.06.007

摘要

目的:构建Pri-miRNA-21/23A基因的重组病毒载体,并在L-02肝细胞中获得表达.方法:设计并合成PrimiRNA-21/23a的基因产物,插入含绿色荧光蛋白Zsgreen基因的真核表达载体pCI MammaLian中,以重组质粒为模板,设计扩增含Zsgreen基因的Pri-miRNA序列产物,并将其与pCDH-CMV-MCS-EF 1-Puro病毒载体连接,将PrimiRNA重组病毒载体转染293T细胞后进行病毒包装,病毒上清转染L-02肝细胞后用荧光显微镜及实时荧光定量PCR确认转染效果.结果:荧光定量PCR结果显示重组病毒上清转染L-02肝细胞感染效果良好,经荧光显微镜观察,证实重组病毒载体能在细胞中表达蛋白.结论:构建了Pri-miRNA21/23a重组病毒表达载体并在L-02肝细胞中表达,奠定了miRNA进一步功能研究的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘建军	深圳市疾病预防控制中心现代毒理学重点实验室	130	729	13.0	21.0
2	任晓虎	深圳市疾病预防控制中心现代毒理学重点实验室	11	21	3.0	4.0
3	张航	深圳市疾病预防控制中心现代毒理学重点实验室	7	13	2.0	3.0
4	钟佳成	深圳大学生命与海洋科学学院	1	0	0.0	0.0
8	卢维雪	深圳市疾病预防控制中心现代毒理学重点实验室	4	3	1.0	1.0
9	胡盼盼	深圳市疾病预防控制中心现代毒理学重点实验室	2	3	1.0	1.0