鼠脑心肌炎病毒TaqMan探针荧光定量RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 张泉 林颖峥 熊炜 蔡骁垚 陈懿斐 陈鸿军 魏晓锋
• 来源期刊: 实验动物科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 鼠脑心肌炎病毒 EMV TaqMan探针 荧光定量RT-PCR
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 13-17
• 页数: 5页
• 分类号: Q95-33
• 字数: 2590字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-6179.2017.05.003

摘要

目的 建立快速诊断鼠脑心肌炎病毒感染的荧光定量RT-PCR方法.方法 根据鼠脑心肌炎病毒(EMV)PEC9毒株全基因组序列(GenBank登录号:DQ288856.1),设计一对特异性引物和TaqMan探针,建立EMV的TaqMan探针荧光定量RT-PCR方法,进行条件优化,检测其特异性,敏感性,稳定性.结果 建立的荧光定量PCR方法,标准曲线的线性关系良好,r2值可达0.99,敏感性最低检测限为1个拷贝数,高于普通PCR方法1000倍,其特异性强,与其他常见感染的小鼠病毒株均无特异性扩增,批内和批间变异系数均小于2％.利用该方法对上海市120份小鼠心肌样品进行检测,未检测到阳性感染.结论 本研究为鼠脑心肌炎病毒感染的分子检测,为制定国家标准提供良好的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张泉	扬州大学兽医学院	51	346	8.0	17.0
2	熊炜		37	146	7.0	9.0
3	魏晓锋		30	60	4.0	5.0
4	蔡骁垚	中国农业科学院上海兽医研究所	4	22	1.0	4.0
8	陈懿斐		6	10	1.0	3.0
9	林颖峥		13	17	3.0	3.0
10	陈鸿军	中国农业科学院上海兽医研究所	57	114	6.0	8.0