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EV71病毒中和表位和诺如病毒P结构域嵌合蛋白的原核表达
EV71病毒中和表位和诺如病毒P结构域嵌合蛋白的原核表达
作者:
刘建生
刘波
刘红旗
李昕潼
李超
陶玉芬
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
肠道病毒71型
诺如病毒
中和抗原表位
亚单位疫苗
摘要:
目的:构建肠道病毒71型(Enterovirus71,EV71)的线性中和抗原表位与诺如病毒P结构域融合基因的重组质粒,在大肠杆菌中表达诺如病毒P结构域与EV71中和抗原表位的嵌合蛋白.方法:根据已报道的3个EV71线性中和抗原表位的氨基酸序列,按大肠杆菌密码子表达使用的偏好性优化和设计各线性中和抗原表位的核苷酸序列,将这些表位以单个或不同的组合克隆至含诺如病毒P结构域和GST标签的质粒中,经测序确认后,分别转化到E.coli BL21 (DE3)感受态细胞中,通过IPTG诱导融合蛋白表达.用GST融合蛋白纯化磁珠对融合蛋白进行纯化,最后通过免疫印迹法确认融合蛋白的表达及嵌合蛋白的抗原性.结果:测序结果表明,成功地构建了含EV71病毒3个单表位和4个串联中和抗原表位的诺如病毒P结构域重组质粒,而且这7个含线性中和抗原表位的嵌合蛋白在大肠杆菌中都以可溶形式得到了表达.免疫印迹分析表达蛋白的抗原性结果表明,表达的嵌合蛋白都能与抗诺如病毒P结构域抗血清反应.除了含单表位的SP55和SP28嵌合蛋白外,其它的嵌合蛋白均能与抗EV71病毒的抗血清反应.结论:成功地在大肠杆菌中表达了诺如病毒P结构域和EV71病毒中和抗原表位的嵌合蛋白,且具有抗原性,这为诺如病毒和EV71病毒的二价疫苗及检测方法的研发奠定了基础.
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篇名
EV71病毒中和表位和诺如病毒P结构域嵌合蛋白的原核表达
来源期刊
中国生物工程杂志
学科
生物学
关键词
肠道病毒71型
诺如病毒
中和抗原表位
亚单位疫苗
年,卷(期)
2017,(1)
所属期刊栏目
研究报告
研究方向
页码范围
1-6
页数
分类号
Q939.99
字数
语种
中文
DOI
10.13523/j.cb.20170101
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
刘红旗
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传播情况
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诺如病毒
中和抗原表位
亚单位疫苗
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研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
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期刊影响力
中国生物工程杂志
主办单位:
中国科学院文献情报中心
中国生物技术发展中心
中国生物工程学会
出版周期:
月刊
ISSN:
1671-8135
CN:
11-4816/Q
开本:
大16开
出版地:
北京中关村北四环西路33号
邮发代号:
82-13
创刊时间:
1976
语种:
chi
出版文献量(篇)
4896
总下载数(次)
30
总被引数(次)
45351
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