表达绿色荧光蛋白的重组绵羊李斯特菌的构建及荧光分析

• 作者: 刘思静 张祥 李泳榆 汪川 苏琳 蒋明娟 黄欢
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 关键词: 绵羊李斯特菌 绿色荧光蛋白 原核表达
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 809-813
• 页数: 5页
• 语种: 中文

摘要

目的 构建表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组绵羊李斯特菌,为绵羊李斯特菌的研究提供重要工具.方法 利用SOEing PCR的方法将单核细胞增生性李斯特菌溶血素的启动子(phly)与GFP基因融合,连接到pCW质粒上,构建重组原核表达质粒pCW-phly-GFP.将重组质粒电转化绵羊李斯特菌,利用荧光显微镜分析荧光表达情况.分别在含红霉素和不含红霉素的BHI肉汤中连续传代培养携带重组质粒的绵羊李斯特菌,通过提取质粒和观察荧光的方法研究重组质粒pCW-phly-GFP及GFP在绵羊李斯特菌中的稳定性.结果 重组质粒pCW-phly-GFP酶切验证和测序均正确.在荧光显微镜下可以见到携带重组质粒的绵羊李斯特菌发绿色荧光.在红霉素抗性压力选择下重组质粒pCW-phly-GFP能稳定存在于绵羊李斯特菌中,并高效表达GFP.结论 成功构建了GFP基因原核表达质粒pCW-phly-GFP,能在绵羊李斯特菌中高效表达GFP,为进一步研究绵羊李斯特菌作为疫苗载体提供了重要的工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪川	四川大学华西公共卫生学院	32	178	9.0	12.0
2	苏琳	四川大学华西公共卫生学院卫生检验与检疫系	13	111	5.0	10.0
3	黄欢	四川大学华西公共卫生学院卫生检验与检疫系	8	30	2.0	5.0
4	刘思静	四川大学华西公共卫生学院卫生检验与检疫系	5	1	1.0	1.0
5	蒋明娟	四川大学华西公共卫生学院卫生检验与检疫系	4	1	1.0	1.0
6	张祥	四川大学华西公共卫生学院卫生检验与检疫系	2	0	0.0	0.0
7	李泳榆	四川大学华西公共卫生学院卫生检验与检疫系	1	0	0.0	0.0