人S100A8基因重组慢病毒表达载体的构建

• 作者: 何志旭 吴莎莎 庹媛媛 李燕 杨小燕 杨红兰 潘海新 胡绍燕 许键炜 金皎 马健娟 黄璟
• 来源期刊: 贵州医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 基因 克隆细胞 高表达 慢病毒载体 构建
• 年，卷（期）: 2017,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1270-1273
• 页数: 4页
• 分类号: Q782|R349.65
• 字数: 2774字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19367/j.cnki.1000-2707.2017.11.007

摘要

目的:构建人S100A8基因高表达的重组慢病毒表达载体.方法:以正常人骨髓单个核细胞的cDNA为扩增模板,克隆S100A8基因全长的cDNA,与pMD19-T载体连接后进行测序鉴定;将pLVX-IRES-puro目的载体与测序正确的S100A8片段进行连接,筛选阳性克隆后进行菌落PCR、双酶切及测序鉴定.结果:pLVX-S100A8重组质粒双酶切及菌落PCR产物与目的基因相关片段S100A8 cDNA大小一致,成功克隆S100A8基因,S100A8基因成功插入到pLVX-IRES-puro.结论:成功构建了人S100A8基因高表达的重组慢病毒表达载体.