乙型脑炎减毒活疫苗生产株SA14-14-2全基因组序列测定及基因遗传稳定性

• 作者: 卓金蓉 吕冰凌 潘海龙 袁良玉 黄敏
• 来源期刊: 微生物学免疫学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型脑炎减毒活疫苗 SA14-14-2株 全基因组序列 E蛋白 遗传稳定性
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 22-26
• 页数: 5页
• 分类号: R512.32
• 字数: 3356字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13309/j.cnki.pmi.2017.01.005

摘要

目的 对乙型脑炎减毒活疫苗生产株SA14-14-2株进行全基因组序列测定和分析,并观察该生产株在疫苗制备过程中的基因遗传稳定性.方法 根据DNA序列数据库(GenBank)公布的SA14-14-2株的序列,设计合成7对引物,提取疫苗生产株SA14-14-2及其工作种子批生产的3批原液、3批成品疫苗的病毒RNA,通过RT-PCR方法扩增SA14-14-2株的cDNA片段,分别克隆到pGEM-T载体, 转化至大肠埃希菌DH5α中, 挑取阳性菌落克隆、鉴定后测定全序列并对序列进行比较分析,观察毒株在传代的过程中病毒滴度的稳定性.结果 乙型脑炎减毒活疫苗生产株SA14-14-2株基因组全长10 976 bp,编码3 433个氨基酸.3批原液和3批成品疫苗的基因组全长为10 977 bp,比较分析发现,在3′端非编码区10 701处多一个G核苷酸的插入.与DNA序列数据库(Genbank)登录号为D90195的全长序列同源性分别是99.9%、99.9%、99.9%、99.9%、99.8%、99.9%、99.8%,其中E蛋白的同源性均为100%.SA14-14-2生产株的病毒滴度为7.22 lg PFU/mL,原液和成品疫苗的滴度分别为7.32、7.23、7.32、6.86、6.92、6.70 lg PFU/mL.结论 乙型脑炎减毒活疫苗生产株SA14-14-2基因稳定,具有良好的一致性,为乙型脑炎减毒活疫苗的质量的稳定性提供了可靠依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘海龙	成都生物制品研究所有限责任公司质量检定室	20	20	3.0	3.0
2	袁良玉	成都生物制品研究所有限责任公司质量检定室	8	9	2.0	3.0
3	黄敏	成都生物制品研究所有限责任公司质量检定室	5	4	1.0	2.0
4	吕冰凌	成都生物制品研究所有限责任公司质量检定室	9	6	1.0	2.0
5	卓金蓉	成都生物制品研究所有限责任公司质量检定室	7	5	2.0	2.0