运用CRISPR/Cas9技术对斑马鱼前肾表达基因的敲除研究

• 作者: 张冲 朱世诚 潘文昊 董国萍 谢贝 阮华 陈雪姣 黄红辉
• 来源期刊: 西南大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: CRISPR/Cas9技术 基因敲除 斑马鱼 前肾
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 54-61
• 页数: 8页
• 分类号: Q959.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.13718/j.cnki.xdzk.2017.05.009

摘要

CRISPR/Cas9是目前最热门的基因编辑技术, 是进行基因敲除的有效手段. 斑马鱼是一种常用的研究脊椎动物器官发育的模式生物, 本实验选取10个斑马鱼前肾表达基因atp1a1a1,atp1a1a.2,atp1a1a.3,atp1a1a.4,atp1a1a.5,pkd2,aqp3a,bmper,isl2a和tbx2a, 运用CRISPR/Cas9技术进行基因敲除以研究肾脏发育. 经过三代筛选, 每个基因获得了至少一种移码突变. 突变体的初步表型分析显示, 10个基因中只有atp1a1a.2和pkd2基因突变可以导致斑马鱼胚胎发育缺陷, 隐性致死, 这与已经报道的突变体或基因敲降结果类似. 上述结果表明CRISPR/Cas9基因编辑技术可在斑马鱼中高效地进行基因敲除, 获得的突变体为以后深入研究斑马鱼前肾发育提供了重要材料.