略阳乌鸡α干扰素原核表达载体构建及诱导条件优化

• 作者: 张涛 杜伟立 王令 路宏朝
• 来源期刊: 黑龙江畜牧兽医（上半月）
• 学科: 农学
• 关键词: 略阳乌鸡 α干扰素 重组载体 原核表达 诱导条件优化
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 51-56
• 页数: 6页
• 分类号: S831|TQ929.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.13881/j.cnki.hljxmsy.20160902.001

摘要

为了探索略阳乌鸡α干扰素在大肠杆菌中高效表达的诱导条件,试验采用PCR获得略阳乌鸡α干扰素成熟肽段的编码区DNA序列,将其克隆至载体pET-32a的HindⅢ和Xho Ⅰ位点间,并通过菌落PCR和测序鉴定获得的鸡α干扰素的原核表达载体pET-32a-ChIFN-α.将pET-32a-ChIFN-α转化至大肠杆菌Rosetta菌株,通过筛选获得阳性克隆,进而分别对诱导表达时间、诱导剂浓度等条件进行筛选,获得了略阳乌鸡0干扰素的最佳表达条件.结果表明:成功构建pET32a-ChIFN-α质粒和重组菌株,最适诱导表达条件为诱导温度37 ℃,诱导剂IPTG浓度0.2 mmol/L,诱导时间5h,诱导时机OD600值为0.448时.说明构建略阳乌鸡α干扰素的原核表达菌株成功,并且实现了α干扰素的高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	路宏朝		53	201	8.0	12.0
2	张涛		91	350	9.0	13.0
3	王令		24	31	4.0	4.0
4	杜伟立		10	11	2.0	2.0