板栗咖啡酸氧甲基转移酶基因CmCOMT的克隆及原核表达

• 作者: 余鹏举 刘应高 刘裕峰 朱天辉 李姝江 韩珊 龙旭梅
• 来源期刊: 西北植物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 板栗 咖啡酸氧甲基转移酶 基因克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 2332-2341
• 页数: 10页
• 分类号: Q785|Q786
• 字数: 6458字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7606/j.issn.1000-4025.2017.12.2332

摘要

该研究根据板栗(Castanea mollissima Bl.)cDNA文库分析得到EST序列,采用RT-PCR技术,克隆板栗咖啡酸氧甲基转移酶(caffeic acid O-methyhransferase,COMT)基因全长cDNA(CmCOMT),分析其编码蛋白的相关信息并进行原核表达研究,为板栗木质素合成关键酶基因Cm COMT的生物学功能研究与应用奠定基础.结果表明:(1) CmCOMT基因(GenBank登录号为KU365322)具有一个1 098 bp开放阅读框(ORF),共编码365个氨基酸,推测蛋白分子质量为39.684 9 kD,理论等电点为5.83,具有植物SAM依赖甲基转移酶的典型特征.(2)CmCOMT核苷酸序列及其编码氨基酸序列与垂枝桦(Betula pendula)和白桦(Betula platyphylla)的相应序列一致性均在90％以上;同源建模表明,CmCOMT的3D模型与苜蓿(Medicago sativa)MsCOMT的蛋白结构相似,推测其可能与MsCOMT具有相似的功能;系统发育树分析显示,CmCOMT与其他植物COMTs具有相同的进化祖先,与桦木科植物物种亲缘关系最近.(3) SDS-PAGE电泳分析表明,CmCOMT蛋白最佳诱导表达条件为0.3 mmol/LIPTG在25℃下诱导6h,蛋白分子量约为44 kD,其主要以可溶性蛋白的形式存在.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘应高	四川农业大学林学院	43	277	10.0	14.0
2	朱天辉	四川农业大学林学院	167	1369	19.0	26.0
3	李姝江	四川农业大学林学院	48	189	9.0	11.0
4	韩珊	四川农业大学林学院	34	182	8.0	12.0
5	刘裕峰	四川农业大学林学院	7	3	1.0	1.0
6	龙旭梅	四川农业大学林学院	4	9	2.0	3.0
7	余鹏举	四川农业大学林学院	2	2	1.0	1.0