轮状病毒外壳蛋白VP7基因在拟南芥种子中表达及免疫原性分析

• 作者: 刘秀明 周永刚 官丽莉 李余先 李校堃 李海燕 杨晶 杨赫 王红雨
• 来源期刊: 黑龙江畜牧兽医（上半月）
• 学科: 生物学
• 关键词: 轮状病毒 VP7 拟南芥 免疫原性 疫苗
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 24-29
• 页数: 6页
• 分类号: Q939.46|Q786
• 语种: 中文

摘要

为了研究开发植物来源的轮状病毒疫苗,试验采用模式植物拟南芥作为生物反应器,将轮状病毒主要中和抗原基因VP7通过农杆菌介导法转化野生型拟南芥,获得了含有VP7的转基因拟南芥稳定株系,并分析其种子表达蛋白的免疫原性.首先根据拟南芥密码子的偏好性,设计合成优化的VP7基因,构建植物表达载体pPHAP1301-His-HRVVP7:然后通过农杆菌介导的Floral Dip法转化拟南芥,收获TO代种子后播种,喷用草铵膦筛选转基因拟南芥获得T1代种子,重复上述过程最终获得T3代拟南芥种子,通过RT-PCR、Western、ELISA法等进行分析.结果表明:VP7基因已成功整合到拟南芥的基因组并进行了转录和蛋白表达,并且VP7蛋白占总可溶性蛋白的0.31％,即每克转基因拟南芥种子中所含目的蛋白为43.3 μg.以转基因拟南芥稳定株系种子中的可溶性蛋白口服免疫小鼠,可使小鼠获得免疫原性.说明通过植物作为生物反应器生产轮状病毒疫苗方法可行.