清脑益智方通过调控PI3K/Akt信号通路抗缺氧复氧诱导皮层神经元细胞凋亡的实验研究

• 作者: 刘玉 朱金墙 林松俊 王硕 秦秀德 虢周科
• 来源期刊: 中国中西医结合杂志
• 关键词: 清脑益智方 血管性痴呆 缺氧复氧 神经元 PI3K/Akt信号转导通路
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1482-1486
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.7661/j.cjim.20170901.253

摘要

目的 观察清脑益智方含药脑脊液对缺氧复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)神经元存活率、凋亡及PI3K/Akt信号转导通路的影响,探讨清脑益智方治疗血管性痴呆的部分机制.方法 原代培养皮层神经元,将神经元细胞(CNC)按照1×106的浓度接种于细胞培养板,将CNC分为正常组(简称NC组)、缺氧复氧组(简称MC组)、正常脑脊液组(简称N-CSF组)、清脑益智方含药脑脊液高剂量组(简称QN-H组)、清脑益智方含药脑脊液低剂量组(简称QN-L组)、恩必普组(简称NBP组).除NC组外,其余各组均在添加相应干预措施后进行缺氧24 h复氧24 h处理.采用CCK-8试剂盒检测细胞活力;采用TUNEL法检测细胞的凋亡情况;采用Western blot法检测磷酸化PI3K及磷酸化Akt蛋白表达;采用逆转录PCR(RT-PCR)法检测PI3K、Akt、mTOR基因表达.结果 与NC组比较,MC组CNC活力(OD值)下降(P＜0.01).CNC凋亡数目明显增多(P＜0.01).PI3K、Akt、mTOR基因表达均显著降低,p-PI3K、p-Akt蛋白表达升高(P＜0.05);与MC组比较,QN-H组OD值升高明显(P ＜0.01);QN-H、QN-L、NBP组神经元凋亡数目明显减少(P＜0.01),其中QN-H组神经元凋亡数目较NBP组更少(P＜0.01);QN-H组PI3K、Akt、mTOR基因表达水平均提高(P ＜0.05,P＜0.01),QN-L组PI3K、Akt基因表达水平亦升高(P＜0.01);QN-H、QN-L、NBP组的p-PI3K蛋白表达水平明显升高(P＜0.05).结论 清脑益智方能提高缺氧复氧致皮层神经细胞活力,减少缺氧复氧引起的皮层神经元的凋亡数目,此作用可能与清脑益智方对PI3 K/A kt信号转导通路的调节有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘玉		6	10	2.0	3.0
2	秦秀德		6	66	3.0	6.0
3	朱金墙		18	104	8.0	9.0
4	王硕		24	177	7.0	12.0
5	林松俊		1	0	0.0	0.0
6	虢周科		1	0	0.0	0.0