慢病毒介导长链非编码RNA LOC100132354过表达载体的构建及鉴定

• 作者: 王君君 王瑜敏 章帆 胡丽娟 陈坚 陈洁
• 来源期刊: 中国卫生检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 慢病毒 过表达载体 长链非编码RNA LOC100132354
• 年，卷（期）: 2017,（18）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2588-2592
• 页数: 5页
• 分类号: R734.2
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨慢病毒介导LOC100132354过表达载体的构建及鉴定.方法 化学合成LOC100132354全基因序列,与GV303载体进行连接反应获得重组质粒;进一步制备感受态细胞,并行转化实验,PCR鉴定进行转化子,对阳性转化子进行测序;构建好的LOC100132354过表达载体转染至293T细胞包装病毒,采用荧光显微镜观察荧光情况,用qPCR检测LOC100132354的表达情况.结果 酶切结果与预期一致,阳性转化子克隆测序结果与LOC100132354的RNA序列完全一致,293T细胞转染后荧光表达结果较强,qPCR结果显示293T细胞转染过表达载体后LOC100132354表达水平为对照组的555427.148倍,差异有统计学意义(P＜0.001).结论 成功构建了慢病毒介导LOC100132354过表达载体,为后续进一步研究提供了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈坚		19	85	5.0	9.0
2	王瑜敏		20	38	4.0	6.0
3	陈洁		43	119	5.0	9.0
4	胡丽娟		11	10	2.0	3.0
5	王君君		7	3	1.0	1.0
6	章帆		7	4	1.0	2.0