草莓镶脉病毒外壳蛋白抗原表位预测、克隆、表达及鉴定

• 作者: 李印武 杨菊梅 潘博 马建忠
• 来源期刊: 植物保护学报
• 关键词: 草莓镶脉病毒 外壳蛋白 抗原表位 原核表达 质谱鉴定
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 439-446
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13802/j.cnki.zwbhxb.2018.2016189

摘要

为实现草莓镶脉病毒(Strawberry vein banding virus,SVBV)的简单和快速检测,应用生物信息学方法分析了SVBV外壳蛋白的线性抗原表位及其理化性质,以大肠杆菌的优势密码子对所预测的优势抗表原位进行设计并合成,同时进行了最佳异源表达条件优化.结果表明,第218～238位的氨基酸残基序列为SVBV外壳蛋白的优势抗原表位,其编码片段为5-AE.十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)检测结果表明,重组融合蛋白的分子量约为24.8 kD,与其理论分子量20.5 kD基本一致.异源表达优化的结果表明,当IPTG浓度为0.5 mmol/L、温度为40℃、诱导时间为4h时,重组融合蛋白的表达量最高,为23.6 mg/L.Western blot结果表明重组融合蛋白能与His多克隆抗体起特异性反应.串联质谱结果表明,5-AE肽段氨基酸残基序列正确.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马建忠	兰州理工大学生命科学与工程学院	40	94	6.0	8.0
2	杨菊梅	兰州理工大学生命科学与工程学院	3	1	1.0	1.0
6	潘博		3	1	1.0	1.0
7	李印武		3	1	1.0	1.0