黄芪甲苷通过激活PI3K/AKT通路抑制内皮细胞内质网应激介导的细胞凋亡的研究

• 作者: 卢美丽 崔伟 王洪新 王高频
• 来源期刊: 中药药理与临床
• 关键词: 黄芪甲苷 内皮细胞 凋亡 PI3K/Akt 内质网应激
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 39-44
• 页数: 6页
• 语种: 中文

摘要

目的:探讨黄芪甲苷对H2O2作用下血管内皮细胞凋亡的影响及作用机制.方法:体外培养人脐静脉血管内皮细胞,H2 O2作用于人脐静脉血管内皮细胞诱导其凋亡,设置空白对照组、模型组(400μ,mol/L H2O2处理)、不同浓度(50、100μmol/L)黄芪甲苷组、LY294002(PI3K抑制剂)10μmol/L组.使用MTI法检测各组细胞活力;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;ELISA法检测各组细胞培养液中NO、TNF-α和IL-6的浓度变化;DHE荧光探针检测ROS的变化;特定试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH-PX)含量;Western blot法检测各组GRP78、CHOP、Caspase12蛋白表达水平以及AKT的磷酸化情况.结果:与空白对照组相比,H2 O2损伤组能够显著降低HUVECs的活力,增加细胞中ROS的含量和凋亡率,LDH、MDA含量显著增加,SOD、GSH-PX活性显著下降,同时降低NO分泌,诱导TNF-α和IL-6分泌及增加了GRP78、CHOP、Caspase12的表达,而P-AKT/AKT表达显著降低.黄芪甲苷50mol./L、100μmoL/L和H2O2同时作用HUVECs时,细胞存活率显著上升,ROS含量及凋亡率显著下降,LDH、MDA含量显著下降,SOD、GSH-PX活性随之上升,同时NO分泌增加,TNF-α和IL-6分泌及GRP78、CHOP、Caspase12蛋白表达显著下降,P-AKT/AKT表达显著增加.LY294002组上述指标的检测结果与黄芪甲苷组相反.结论:黄芪甲苷能够提升H2 O2作用下HUVECs活力,降低凋亡率,恢复细胞分泌功能,增强细胞抗氧化能力,减少细胞的炎性反应,黄芪甲苷可能部分通过激活PI3K/AKT通路抑制内皮细胞内质网应激,从而对血管内皮细胞发挥保护作用.