玉米赤霉烯酮通过PI3K/Akt/mTOR通路诱导大鼠睾丸支持细胞自噬及对细胞周期分布的影响

• 作者: 冯楠楠 刘学忠 刘宗平 卞建春 朱启航 王冰洁 袁燕 邹辉 郑王龙 顾建红
• 来源期刊: 南京农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 玉米赤霉烯酮 睾丸支持细胞 G2/M期阻滞 PI3K/Akt/mTOR通路 自噬
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 708-714
• 页数: 7页
• 分类号: S851.4
• 字数: 4735字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7685/jnau.201712033

摘要

[目的]探究磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3 K/Akt/mTOR)信号通路在玉米赤霉烯酮(ZEA)诱导睾丸支持细胞(SC)自噬及影响SC细胞周期分布中的作用,揭示ZEA对雄性生殖毒性的机制.[方法]以Wistar大鼠原代睾丸支持细胞为材料,利用Western blot、流式细胞术和免疫荧光技术等方法检测PI3K/Akt/mTOR信号通路在ZEA对SC自噬及细胞周期分布的影响.[结果]随着ZEA浓度升高,PI3K/Akt/mTOR信号通路关键蛋白磷酸化水平显著或极显著下降(P＜0.05或P＜0.01);加入PI3K抑制剂LY294002后,微管相关蛋白1轻链3(LC3)的荧光信号强度显著增强,荧光聚点更加明显(P＜0.01);同时,与ZEA单独处理组比,Akt、mTOR磷酸化水平显著或极显著下降(P＜0.05或P＜0.01),LC3Ⅱ/LC3 I表达量极显著上升(P＜0.01);G2/M期关键蛋白Cdc2、Cdc25B等表达水平随着ZEA浓度的升高显著或极显著下降(P＜O.05或P＜0.01),磷酸化组蛋白H3(p-histone H3)的荧光明显减少;加入PI3K抑制剂LY294002后,ZEA致睾丸支持细胞G2/M期阻滞的比例显著降低(P＜0.05),且细胞周期关键激酶Cdc2的活性显著增加(P＜0.05).[结论]通过PI3K/Akt/mTOR信号通路,一定浓度范围的ZEA在诱导SC自噬中起负调控作用,而此通路的激活可以部分逆转ZEA对SC细胞G2/M期的阻滞,从而起到保护作用.