四种分子伴侣促进牛支原体膜蛋白在大肠杆菌中可溶性表达研究

• 作者: 周雅坪 张新竹 李松建 王艳芳 郝永清 麻昌姣 黄海碧
• 来源期刊: 中国农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 分子伴侣 牛支原体 膜蛋白 可溶性表达 原核表达系统
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 页码范围: 75-83
• 页数: 9页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2018.12.09

摘要

为研究分子伴侣是否可以促进牛支原体膜蛋白在大肠杆菌中以可溶性形式表达及表达的蛋白是否具有活性,应用原核表达和Western blot方法进行检测,结果表明:1)牛支原体一个膜蛋白M1的截短片段在大肠杆菌表达系统中以包涵体形式表达,改变诱导时间、温度以及诱导剂浓度均未改变其表达形式;2)将4种分子伴侣pG-KJE8、pGr07、pG-Tf2和pTfl6分别与含有目的蛋白的重组质粒在表达工程菌(BL21)中共表达,当加入终浓度为1.0 mmol/L IPTG以及0.5 mg/mL L-阿拉伯糖或5.0 ng/mL四环素的诱导剂,37℃诱导5h,发现分子伴侣pG-Tf2和pG-KJE8能显著提高M1截短片段的可溶性表达,其他2种分子伴侣未改变M1的表达形式;3)可溶性表达的M1截短片段与牛支原体阳性血清可以发生特异性反应.因此,研究发现2种分子伴侣可以使牛支原体膜蛋白在大肠杆菌表达系统中以可溶性形式表达,但未改变其生物活性,该研究结果可为建立牛支原体有效的血清学诊断方法及亚单位疫苗的研制奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王艳芳	内蒙古农业大学兽医学院	16	57	4.0	6.0
5	黄海碧	内蒙古农业大学兽医学院	10	27	3.0	4.0
6	周雅坪	内蒙古农业大学兽医学院	4	4	2.0	2.0
7	李松建	内蒙古农业大学兽医学院	6	25	2.0	5.0
8	麻昌姣	内蒙古农业大学兽医学院	4	11	2.0	3.0
9	张新竹	内蒙古农业大学兽医学院	2	4	2.0	2.0