鲤浮肿病毒和锦鲤疱疹病毒双重实时荧光定量PCR检测方法的建立

• 作者: 吕晓楠 张文 徐立蒲 曹欢 王姝 王小亮 王静波
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鲤浮肿病毒(CEV) 锦鲤疱疹病毒(KHV) 双重实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 动物病毒研究论著
• 页码范围: 889-895
• 页数: 7页
• 分类号: S941.41|R155.5
• 语种: 中文

摘要

为了建立可同时检测鲤浮肿病毒(Carp edema virus,CEV)和锦鲤疱疹病毒(Kio herpesvirus,KHV)的检测方法,本研究根据CEV P4a基因保守序列,对英国环境、渔业水产养殖研究中心(Center for Environment,Fisheries and Aquaculture Science,CEFAS)设计合成的引物序列进行优化,合成1对特异性引物和1条用FAM荧光基团标记的TaqMan探针;根据KHV ORF7基因保守序列,设计筛选1对特异性引物和1条用VIC荧光基团标记的Taq-Man探针.优化反应条件,建立了CEV和KHV双重实时荧光定量PCR检测方法.结果显示该方法特异性强,与其它水生动物病毒无交叉反应;灵敏度高,对CEV和KHV的检测限均为15拷贝数/μL;组内重复与组间重复的平均变异系数小于3％.本研究建立的方法具有快速、特异、敏感等优点,可用于CEV和KHV的快速检测.