沙葱萤叶甲丝氨酸蛋白酶基因GdSP的克隆及对温度胁迫的响应

• 作者: 单艳敏 孙学涛 庞保平 张玉 霍志家
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 沙葱萤叶甲 丝氨酸蛋白酶 基因克隆 温度胁迫 表达分析
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 761-770
• 页数: 10页
• 分类号: Q966
• 语种: 中文
• DOI: 10.16380/j.kcxb.2018.07.002

摘要

[目的]丝氨酸蛋白酶 (serine protease, SP) 是一类以丝氨酸为活性中心的重要的蛋白水解酶.本研究旨在克隆获得沙葱萤叶甲Galeruca daurica丝氨酸蛋白酶基因, 分析其对温度胁迫的响应, 以期为进一步揭示沙葱萤叶甲耐温性的调控机制及其他生理功能奠定基础.[方法]根据沙葱萤叶甲2龄幼虫转录组数据, 采用RACE技术克隆得到沙葱萤叶甲丝氨酸蛋白酶基因的cDNA全长序列, 并进行生物信息学分析;应用qPCR技术检测其在不同温度 (-10,-5, 0, 5, 25和35℃) 下处理1 h后及25℃下恢复30 min后在沙葱萤叶甲2龄幼虫中的表达量变化.[结果]自沙葱萤叶甲克隆获得一个丝氨酸蛋白酶基因, 命名为GdSP (GenBank登录号:MG797556).该基因全长1 110 bp, 开放阅读框969 bp, 编码322个氨基酸;蛋白预测分子量35.41 kD, 等电点5.61;编码蛋白具有丝氨酸蛋白酶的典型特征, 具有一个跨膜结构, 无信号肽.同源序列比对和系统发育分析表明, GdSP与光肩星天牛Anoplophora glabripennis SP的同源性最高, 氨基酸序列一致性为30.53％.qPCR测定结果表明, 不同温度处理间2龄幼虫中GdSP表达量差异不显著, 但对各高低温 (-10℃除外) 胁迫处理回温后GdSP表达量显著上升.[结论]快速冷驯化对沙葱萤叶甲丝氨酸蛋白酶基因表达无显著影响, 而回温可诱导其上调表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张玉	内蒙古农业大学草原昆虫研究中心	67	166	7.0	8.0
2	庞保平	内蒙古农业大学草原昆虫研究中心	104	1186	20.0	27.0
3	单艳敏	内蒙古农业大学草原昆虫研究中心	9	31	4.0	5.0
7	霍志家	内蒙古农业大学草原昆虫研究中心	3	4	1.0	2.0
8	孙学涛		1	0	0.0	0.0