重组水疱性口炎病毒载体病毒包装体系的建立及优化

• 作者: 余云舟 刘珠果 卢建博 叶建强 戴秋云 郑文铝
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 重组水疱性口炎病毒载体 包装体系 寨卡病毒 优化
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 183-188
• 页数: 6页
• 分类号: Q78|R392.1
• 字数: 4406字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2018.02.005

摘要

目的:建立并优化重组水疱性口炎病毒(VSV)载体病毒包装体系,以获得稳定高效的重组VSV载体疫苗包装系统.方法:以prVSV△G-GFP为骨架载体,pBS-N、pBS-P、pBS-G、pBS-L为辅助载体,探索不同的骨架质粒及辅助质粒用量、包装细胞系、重组痘病毒vTF7-3作用时间、转染试剂作用时间等因素对重组VSV载体病毒包装的影响,用光学显微镜及荧光显微镜观测重组VSV载体病毒的包装效果,应用TCID50法测定重组VSV的滴度.结果:重组VSV的包装效率随着辅助质粒或包装质粒总量的减少而降低,293T细胞较BHK21-WI2细胞包装效率更高,适当延长重组痘病毒vTF7-3作用时间或转染试剂作用时间能提高VSV包装效率.优化的病毒包装条件为:选用293T细胞,vTF7-3以5～15 MOI感染细胞1h或以5 MOI感染细胞1～4 h,总质粒用量为3.67～22 μg,转染细胞6～14 h可获得高效包装的rVSV△G-GFP.采用优化包装条件高效包装了rVSV△G-ZE病毒.结论:获得了稳定高效的重组VSV包装体系,为重组VSV载体的疫苗研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余云舟	军事医学研究院生物工程研究所	23	111	6.0	9.0
2	刘珠果	军事医学研究院生物工程研究所	25	74	5.0	6.0
3	戴秋云	军事医学研究院生物工程研究所	61	242	9.0	11.0
4	叶建强	扬州大学兽医学院	18	237	9.0	15.0
5	卢建博	军事医学研究院生物工程研究所	1	2	1.0	1.0
6	郑文铝	军事医学研究院生物工程研究所	2	2	1.0	1.0