摘要:
目的 建立咖啡中同时测定5-咖啡酰奎宁酸、3-咖啡酰奎宁酸、4-咖啡酰奎宁酸、3, 4-二咖啡酰奎宁酸、 4, 5-二咖啡酰奎宁酸、3, 5-二咖啡酰奎宁酸6种绿原酸的高效液相色谱(high performance liquid chromatography, HPLC)检测方法,以及测定产自云南普洱的铁皮卡品种咖啡在不同烘焙风味下的绿原酸含量规律.方法 样品经纯水超声提取2次,过滤后供HPLC测定,采用甲醇(A)和0. 1%磷酸(B)作为流动相进行梯度洗脱采用C18柱进 行分离,光电二极管阵列(photo-diode array, PDA)检测器最终检测.结果 本方法在1 h内完成了 6种绿原酸的 分离分析.6种绿原酸在0. 10~100. 0 mg/L范围内具有良好的线性,相关系数(r)≥0. 999, 检出限为0. 05~ 0. 10 mg/kg, 定量限为 0. 18~0. 29 mg/kg.在 2000、5000、10000 mg/kg 添加水平的加标回收率为 96. 3%~104. 8%,相对标准偏差(relative standard deviation, RSD)为0. 58%~2. 10%之间(n=6).在生咖啡豆中总绿原酸含量最高,意式 烘焙(23 min, 250 ℃)最低,5-咖啡酰奎宁酸、4-咖啡酰奎宁酸和4,5-二咖啡酰奎宁酸这3种绿原酸在生咖啡豆到 极轻度烘焙(12 min, 230℃)这个阶段,含量逐渐上升并达到含量最高,由极轻度烘焙(12 min, 230 °C)到意式烘焙 (23min, 250 °C)含量逐渐降低,而3-咖啡酰奎宁酸、3, 4-二咖啡酰奎宁酸和3, 5-二咖啡酰奎宁酸3种绿原酸从生 咖啡豆至意式烘焙(23min,250℃)都呈下降趋势.结论 该方法快速、准确、灵敏,适合测定绿原酸含量.