布渣叶查耳酮合酶基因全长cDNA克隆及其表达模式分析

• 作者: 岳春华 张初梅 李坤平 林爽 黄奕辉
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 布渣叶 查耳酮合酶 基因克隆 基因表达模式 原核表达载体
• 年，卷（期）: 2018,（17）
• 所属期刊栏目: 药材与资源
• 页码范围: 4118-4124
• 页数: 7页
• 分类号: R282.12
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.17.023

摘要

目的 克隆布渣叶查耳酮合酶基因(MpCHS)全长cDNA,并对其在不同部位和不同生长阶段叶片中的表达模式进行分析.方法 以布渣叶叶片总RNA逆转录合成cDNA为模板,根据其转录组数据设计特异引物序列,PCR扩增MpCHS基因全长cDNA,经质粒连接、转化、扩培,挑选阳性克隆测序、分析并构建原核表达载体.同时,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)对MpCHS基因的表达模式进行分析.结果 成功克隆得到MpCHS基因全长cDNA (GenBank:KY472608).生物信息学分析表明其开放阅读框为1 176bp,编码含391个氨基酸的蛋白,其相对分子质量为42 700,理论等电点6.11,具有CHS家族蛋白3个保守的功能活性位点(165 C、304 H和337N)和特征多肽标签序列RLMMYQQGCFAGGTVLR和GVLFGFGPGL.系统进化树分析发现MpCHS与可可、陆地棉等木本植物的亲缘关系比较近.RT-qPCR结果表明,MpCHS基因在不同部位均有表达,在叶片中的表达量随着生长过程逐步降低.结论 首次克隆得到MpCHS基因,并分析了MpCHS基因在布渣叶不同部位和不同生长阶段叶片中的表达模式,为MpCHS基因的原核表达和功能验证奠定了基础,也为进一步解析布渣叶黄酮类生物合成途径提供了参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林爽	广东药科大学药学院	7	19	3.0	4.0
2	黄奕辉	广东药科大学药学院	2	10	1.0	2.0
3	李坤平	广东药科大学药学院	18	27	3.0	5.0
4	张初梅	广东药科大学药学院	5	1	1.0	1.0
5	岳春华	广东药科大学药学院	1	0	0.0	0.0