不同形式CA16病毒颗粒的分离鉴定与免疫原性初步分析

• 作者: 刘少华 张为庆 李秀玲 赵中翔 郝春生 郭会杰 马淑花 鲁卫卫
• 来源期刊: 中国新药杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CA16病毒 病毒颗粒 免疫原性
• 年，卷（期）: 2018,（15）
• 所属期刊栏目: 重大新药创制专项巡礼
• 页码范围: 1731-1736
• 页数: 6页
• 分类号: R373.9
• 语种: 中文

摘要

目的:制备不同形式的CA16病毒颗粒, 并对其免疫原性进行初步分析.方法:采用蔗糖密度梯度超速离心法和阴离子交换层析法, 将CA16病毒进行分离纯化, 收集相应组分, 测定各组分抗原、蛋白含量, 并进行SDS-PAGE、Western Blot、电镜鉴定.将分离到的不同病毒颗粒组分分别免疫小鼠, 于0, 14和28 d腹腔注射接种3次, 末次免疫后14 d眼眶采血、分离血清.采用微量细胞病变抑制法检测血清中抗CA16病毒中和抗体效价.结果:CA16病毒液经超速离心和阴离子交换层析后, 可分离得到2种形式的病毒颗粒:EP和FP.电镜下EP表现为空心颗粒、FP为实心颗粒.SDS-PAGE结果显示:EP可见VP0, VP1, VP3蛋白条带;FP可见VP1, VP2, VP4蛋白条带.EP, FP免疫小鼠后, 均可诱导产生针对CA16病毒的中和抗体, 但EP诱导产生的中和抗体效价远低于FP, 两者间具有统计学差异.结论:体外培养的CA16病毒存在EP和FP 2种病毒颗粒形式, 二者均具有免疫原性, 但FP高于EP.