同源引物的非等量PCR

• 作者: 上官云杰 刘亮伟 杨昂 梁亚萍 程晋生 黄亚威
• 来源期刊: 河南科学
• 关键词: 非等量 同源引物 PCR DNA
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 生命科学与环境科学
• 页码范围: 326-333
• 页数: 8页
• 分类号: Q566
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-3918.2018.03.006

摘要

为确定引物量对同源引物扩增DNA的影响.将正向引物GFO与同源度为45%、90%、100%、54%、9%的反向引物CR1、CR2、CR3、CR4、CR5分别用于扩增5.9 kb pET20b-C2-G10-C2模式DNA.等量引物(500 nmol/L)时, CR3和CR4均无法扩增目的条带.而非等量PCR时,将反向引物量降低10倍(50 nmol/L),CR3和CR4均扩增出目的条带,即正向引物量降低10倍时,五对引物均扩增出目的条带.CR3降低100倍、CR4降低10倍扩增DNA最多,经15~20次循环五对引物扩增DNA最多.实验结果表明,非等量PCR通过降低单侧引物量减少引物二聚体形成,从而扩增双链DNA.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘亮伟	河南农业大学生命科学学院	36	241	9.0	14.0
3	梁亚萍	河南农业大学生命科学学院	2	1	1.0	1.0
4	程晋生	河南农业大学生命科学学院	2	1	1.0	1.0
7	黄亚威	河南农业大学生命科学学院	2	6	1.0	2.0
8	杨昂	河南农业大学生命科学学院	2	6	1.0	2.0
9	上官云杰	河南农业大学生命科学学院	2	6	1.0	2.0