肺炎克雷伯氏菌漆酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的高效表达

• 作者: 付禹 刘逸寒 张妤彤 桂爽 王建玲 路福平 郑东
• 来源期刊: 天津科技大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 漆酶 毕赤酵母 异源表达 酶学性质
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 食品与生物技术
• 页码范围: 12-17
• 页数: 6页
• 分类号: Q814.4
• 字数: 3906字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13364/j.issn.1672-6510.20170190

摘要

以肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)基因组为模板,通过PCR扩增得到其漆酶基因lac;基于毕赤酵母密码子偏爱性优化后,得到新型漆酶基因lacm;将其与大肠杆菌-毕赤酵母(E.coli-P.pastoris)穿梭表达载体pPIC9K连接,构建重组质粒pPIC9K-lacm;将该质粒转化毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中,实现该漆酶的胞外分泌表达,发酵液中重组漆酶(rLACM)活力达0.37 U/mL.经对rLACM酶学性质分析表明:rLACM的最适温度为70℃,最适pH为8.0,在30～70℃、pH 5.0～9.0活力稳定.