过表达UGPase基因和BCSP31基因的重组流产布氏杆菌的构建与鉴定

• 作者: 卜昭阳 屈海龙 杨艳玲 梁佳茗 王兴龙 王晓旭 王秀然 王莉 郎需龙 钱晶
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 流产布氏杆菌 UGPase基因 BCSP31基因 疫苗候选株
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 44-49
• 页数: 6页
• 分类号: S852.614
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0003

摘要

为提高流产布氏杆菌S19疫苗株的免疫保护效果,分别扩增流产布氏杆菌UGPase基因和BCSP31基因,将其插入含有双启动子pR/pL序列的广宿主穿梭质粒pBBR1MCS-PT中,电转至流产布氏杆菌S19感受态细胞并经抗性基因筛选,采用PCR法对重组菌株的遗传稳定性进行检测,利用蛋白分析手段对目的基因的表达情况进行分析.PCR检测结果显示,构建的重组流产布氏杆菌S19-UGPase株和S19-BCSP31株的遗传性状稳定.SDS-PAGE与Western-blot结果显示,在33和31ku处可见明显条带,且与His标签抗体的反应位置一致,表明目的蛋白获得正确表达.结果表明,构建的过表达重组流产布氏杆菌S19-UGPase株和S19-BCSP31株能够稳定表达目的基因,为下一步开展S19-UGPase株和S19-BCSP31株免疫效果的评价奠定了基础.