流产布鲁氏菌BCSP31基因在大肠杆菌中的可溶性高效表达

• 作者: 周继章 曹小安 蔺国珍 邱昌庆
• 来源期刊: 吉林农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 流产布鲁氏菌 BCSP31基因 克隆 可溶性表达
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医
• 页码范围: 683-686
• 页数: 4页
• 分类号: S852.4
• 字数: 2777字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-5684.2007.06.022

摘要

设计1对引物,突变除去布鲁氏菌BCSP31(细胞表面蛋白31)基因的N端信号肽氨基酸序列,经Not Ⅰ和EcoR Ⅰ酶切后与相同处理的表达载体pGEX-4T-1连接,转化BL21(DE3)感受态细胞.酶切及PCR扩增鉴定,获得阳性克隆,测序证明其阅读框完全正确.用IPTG诱导表达构建成功的阳性克隆,对产物进行SDS-PAGE和Western-blotting检测,发现表达产物出现预期分子量57 kD的融合蛋白,该蛋白能与牛流产布鲁氏菌阳性血清发生反应,进一步证明目的蛋白主要以可溶性形式存在,表达量约占总蛋白的40%,应用GST琼脂糖凝胶FF纯化可得到纯度较高的表达产物.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周继章	中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室	28	198	8.0	13.0
2	邱昌庆	中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室	41	326	10.0	16.0
3	曹小安	中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室	22	104	5.0	10.0
5	蔺国珍	中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室	6	19	3.0	4.0