转录因子LRF蛋白POZ结构域的表达与纯化

• 作者: 于孟斌 刘子矜 徐志卿 杨予涛
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: LRF POZ结构域 原核表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 420-425
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2019.05.0071

摘要

[目的]旨在原核表达转录因子LRF的POZ结构域,纯化获得GST-POZ融合蛋白.[方法]以SD大鼠海马组织cDNA为模板,利用PCR扩增带有EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点的LRF基因的POZ结构域,并将其插入到原核表达载体pGEX-4T-1中,将构建成功的pGEX-4T-1-POZ原核表达质粒转化到大肠杆菌BL21 (DE3),用IPTG诱导融合蛋白表达,再利用MagneGST particles亲和纯化GST-POZ融合蛋白,最后通过Western Blot鉴定融合蛋白.[结果]pGEX-4T-1-POZ原核表达质粒构建成功;在37℃条件下,浓度为0.2 mmol/L的IPTG诱导7h能够使重组蛋白大量表达,经MagneGST particles纯化后的GST-POZ重组蛋白能够被识别LRF的抗体特异性识别.[结论]纯化后的GST-POZ重组蛋白能够用于后续的生物学研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐志卿		29	45	4.0	6.0
2	杨予涛		17	12	2.0	3.0
3	刘子矜		2	1	1.0	1.0
4	于孟斌		1	0	0.0	0.0