小鼠干扰素γ受体β基因启动子荧光报告载体构建及转录活性分析

• 作者: 周涛 巩伟丽 李亭亭 李卫华 樊浩 王心正 王棋 韩秋影
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 干扰素γ 受体 启动子 转录因子 转录调控
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 16-21
• 页数: 6页
• 分类号: R965.2|R967
• 字数: 3698字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2019.01.003

摘要

目的 克隆小鼠干扰素γ受体β(Ifngr2)基因启动子,并应用双荧光素酶报告系统对其进行功能分析.方法 首先应用欧洲启动子在线数据库(EPD)获得小鼠Ifngr2基因的启动子区域,包含转录起始位点在内的-1344～+48的DNA序列.然后以小鼠MEF细胞基因组DNA为模板,利用PCR扩增调取该序列,并进一步插入pGL4.19-luc2CP荧光素酶报告载体.通过PCR扩增获得启动子系列截短体并分别插入pGL4.19-luc2CP载体,共获得包含6个不同长度启动子序列的荧光素酶报告载体.进一步通过双荧光报告实验检测不同截短体对Ifngr2基因转录活性影响,确定其影响转录活性的关键区域.通过点突变探究潜在转录因子对Ifngr2基因转录的影响.结果 成功构建小鼠Ifngr2基因启动子荧光素酶报告载体,获得有转录活性的启动子报告基因载体.启动子系列截短分析显示,-132～-97和-1059～-727包含启动子重要元件.生物信息学分析发现,在-132～-97区域内存在潜在的NF-κB结合位点,进而通过点突变实验得到验证.结论 通过构建小鼠Ifngr2基因启动子报告载体并对Ifngr2启动子进行功能分析,发现小鼠Ifngr2基因启动子中的转录因子NF-κB结合区域,提示NF-κB在Ifngr2基因表达调控中起重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	巩伟丽		22	150	6.0	12.0
2	周涛		23	177	6.0	13.0
3	韩秋影		8	11	2.0	3.0
4	李卫华		7	13	2.0	3.0
5	王心正		5	7	2.0	2.0
6	王棋		1	1	1.0	1.0
7	樊浩		2	1	1.0	1.0
8	李亭亭		1	1	1.0	1.0