应用以人转录组为靶点的shRNA文库筛选肺癌肿瘤相关抑制基因

• 作者: 周春水 徐晖 李希
• 来源期刊: 实用肿瘤学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: shRNA文库 软琼脂克隆形成 肿瘤抑制因子 INPP4B
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 97-102
• 页数: 6页
• 分类号: R394.3
• 字数: 3957字
• 语种: 中文
• DOI: 10. 11904/j. issn. 1002-3070. 2019. 02. 001

摘要

目的 应用shRNA文库筛选肺上皮细胞相关肿瘤抑制基因,并验证其抑制细胞恶性转化的功能,为肿瘤防治提供新的靶点.方法 用GP2-293病毒包装细胞系建立shRNA逆转录病毒文库,感染永生化肺上皮细胞BEAS-2B,经软琼脂克隆形成实验筛选转染的上皮细胞克隆,选择转化细胞克隆经PCR扩增出所插入的shRNA片段,经Sanger法测序和比对确定相应shRNA的靶点基因.通过软琼脂克隆及裸鼠成瘤实验验证候选肿瘤抑制基因INPP4B的肿瘤抑制功能. MTT实验检测细胞的增殖情况.结果 通过软琼脂克隆形成筛选出6个候选基因,选取INPP4B进行功能验证.在BEAS-2B细胞中沉默INPP4B基因可促进细胞的克隆形成,细胞增殖速度加快,沉默细胞系在裸鼠皮下成瘤能力增强,说明INPP4B参与肿瘤形成.结论 shRNA文库及软琼脂克隆形成实验是筛选肿瘤抑制基因的一个有力工具,INPP4B是肺上皮细胞恶性转化抑制因子.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李希	大连医科大学附属第一医院检验科	1	1	1.0	1.0
2	周春水	哈尔滨医科大学遗传学教研室	7	6	2.0	2.0