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兔p38MAPK基因沉默腺病毒载体构建及体外干扰效率的鉴定
兔p38MAPK基因沉默腺病毒载体构建及体外干扰效率的鉴定
作者:
于果
全钢
岳金
肖文林
许尧祥
贾铠宁
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
p38丝裂原活化蛋白激酶
基因沉默
腺病毒载体
瘢痕增生
成纤维细胞
摘要:
目的 构建并筛选p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)基因沉默腺病毒载体,为进一步研究及应用p38MAPK基因沉默进行瘢痕增生基因治疗奠定基础.方法 依据兔p38MAPK基因的cDNA序列,设计并合成3对干扰序列,并对腺病毒进行包装.分别将以上3对双链DNA oligo退火后连入pDC316-ZsGreen-shRNA载体,经PCR及测序鉴定后,将以上质粒分别与包装质粒混合物共转染HEK293A细胞,包装产生病毒颗粒.各组病毒栽体载染兔皮肤成纤维细胞后,运用实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测p38MAPK表达水平.结果 PCR和测序证实目的双链DNA oligo片段已被准确克隆到pDC316-ZsGreen-ShRNA载体;real-time PCR检测到各组慢病毒感染兔皮肤成纤维细胞后均可以明显抑制p38MAPK mRNA的表达(P<0.05).以AD-shRNA-P38MAPK-1组抑制效果最明显.结论 成功构建并筛选出针对p38MAPK的最有效RNAi腺病毒表达载体;构建的腺病毒载体可以抑制兔皮肤成纤维细胞p38MAPK的表达.
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篇名
兔p38MAPK基因沉默腺病毒载体构建及体外干扰效率的鉴定
来源期刊
重庆医学
学科
医学
关键词
p38丝裂原活化蛋白激酶
基因沉默
腺病毒载体
瘢痕增生
成纤维细胞
年,卷(期)
2019,(9)
所属期刊栏目
论著·基础研究
研究方向
页码范围
1467-1471
页数
5页
分类号
R782.2
字数
3742字
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1671-8348.2019.09.006
五维指标
传播情况
被引次数趋势
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(/年)
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基因沉默
腺病毒载体
瘢痕增生
成纤维细胞
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
重庆医学
主办单位:
重庆市卫生信息中心
重庆市医学会
出版周期:
半月刊
ISSN:
1671-8348
CN:
50-1097/R
开本:
大16开
出版地:
重庆市渝北区宝环路420号
邮发代号:
78-27
创刊时间:
1972
语种:
chi
出版文献量(篇)
30732
总下载数(次)
32
总被引数(次)
193615
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