SUMO融合表达对淀粉酶N-Amy活性的影响

• 作者: 向腊 巫攀 张桂敏 王美星 胡慧贞
• 来源期刊: 湖北大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 碱性淀粉酶 N端结构域 SUMO蛋白 底物结合能力 比酶活
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 酶的催化与转化研究专栏
• 页码范围: 217-222
• 页数: 6页
• 分类号: Q556
• 字数: 4986字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2375.2019.03.001

摘要

前期解析了一个来自嗜碱菌Bacillus pseudofirmus 703的新型的碱性淀粉酶Amy703,该酶含有一个未知功能的N端结构域,将该结构域缺失后得到的突变体N-Amy相对野生型Amy703比酶活提高了35倍;底物结合实验显示Amy703可以结合不可溶性底物,单独的N端结构域和N端结构域缺失突变体N-Amy都不能结合,推测N端结构域会造成催化结构域的结构变化从而引起比酶活的大幅提高.为了进一步探究Amy703特异的N端结构域造成酶活显著下降的原因,将Amy703的N端结构域替换为SUMO蛋白,实验结果显示裂解液上清的SUMO/N-Amy条带比Amy703粗亮,验证了SUMO蛋白的促可溶性作用;但纯化后的融合蛋白SUMO/N-Amy的比酶活显著低于N-Amy,仅和野生型Amy703的比酶活相当,表明SUMO与N-Amy的融合显著降低了酶活,同时也预示着N端多一段结构域会影响到催化结构域的结构变化.此外,对SUMO/N-Amy融合蛋白是否与底物结合进行了探讨,为进一步解析Amy703的N端结构域功能提供了实验依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张桂敏	湖北大学生命科学学院	41	239	9.0	13.0
2	王美星	湖北大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
3	向腊	湖北大学生命科学学院	3	3	1.0	1.0
4	胡慧贞	湖北大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
5	巫攀	湖北大学生命科学学院	4	4	1.0	2.0