猪细胞因子信号传导抑制因子1蛋白的表达纯化与多克隆抗体制备

• 作者: 乔松林 夏爽飞 张改平 柴书军 罗雪刚 谢莎 陈鑫鑫
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪SOCS1 生物信息学分析 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 707-714
• 页数: 8页
• 分类号: S852
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0084

摘要

为制备猪细胞因子信号传导抑制因子1(SOCSl)的多克隆抗体,采用RT-PCR扩增猪SOCS1基因序列,将其克隆至原核表达载体pET-28a(+),构建重组表达载体pET28a-pSOCS1,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,在不同温度、IPTG浓度、诱导时间等条件下进行表达,确定最佳表达条件,并对重组蛋白pSOCS1进行纯化.以表达的重组蛋白pSOCS1免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,经4次免疫,间接ELISA测得抗体效价达到l∶51 200.Western-blot和间接免疫荧光试验结果表明,该多克隆抗体可与pSOCS1重组蛋白和经HEK293T细胞过表达的pSOCS1蛋白发生特异性反应,证明pSOCS1重组蛋白免疫原性良好.本研究为后续制备单克隆抗体、研究猪SOCS1相关作用机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张改平		103	840	15.0	24.0
2	乔松林		32	92	5.0	8.0
3	陈鑫鑫		5	24	3.0	4.0
4	柴书军		16	147	8.0	11.0
5	夏爽飞		1	0	0.0	0.0
6	罗雪刚		1	0	0.0	0.0
7	谢莎		1	0	0.0	0.0