TaqMan-MGB探针荧光定量PCR检测致对虾急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌

• 作者: 吴祥庆 童桂香 韦信贤 黄光华 黄鸾玉 黎小正
• 来源期刊: 湖南农业大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 对虾 急性肝胰腺坏死病 副溶血弧菌 TaqMan-MGB探针 荧光定量PCR方法
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·水产
• 页码范围: 405-411
• 页数: 7页
• 分类号: S945.4+62|S917.1
• 字数: 4922字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13331/j.cnki.jhau.2019.04.012

摘要

根据pirAVp基因保守序列设计特异性引物和TaqMan-MGB探针,经优化反应体系及条件,建立检测致对虾急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌(VpAHPND)的TaqMan-MGB探针荧光定量PCR方法;以重组质粒为标准品制作标准曲线,并进行特异性、敏感性、重复性及临床应用试验.结果表明:该方法定量范围宽,起始模板浓度范围为1×101～1×109拷贝/反应时,标准曲线具良好的线性关系;最低检测限约为10拷贝/反应,与对虾其他病原菌及病毒无交叉反应,重复试验变异系数为0.37％～0.47％,可在1 h内完成单个样品检测;对临床对虾样品及水样的检测结果表明,与世界动物卫生组织(OIE)推荐的套式PCR法相比,可提高VpAHPND的阳性检出率,且检测为阳性的样品包含全部套式PCR法检测为阳性的样品.可见,应用TaqMan-MGB探针建立的检测VpAHPND的荧光定量PCR方法具有灵敏度高、特异性强、重复性好、能快速定量等优点,可用于临床对虾样品及水样的VpAHPND检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄光华		44	172	7.0	11.0
5	黎小正		52	274	10.0	13.0
6	吴祥庆		44	201	9.0	11.0
7	黄鸾玉		10	13	2.0	3.0
8	童桂香		25	116	6.0	9.0