星点设计-效应面法优化复合酶解酪蛋白制备抗凝血肽的工艺研究

• 作者: 吴雄 夏建开 张兆霞 李棂灵 苗艳丽 郭婉婷 陈绍红
• 来源期刊: 药学研究
• 学科: 工学
• 关键词: 星点设计-效应面法 酪蛋白 复合酶解 抗凝血肽 体外溶栓
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 制剂研究
• 页码范围: 336-342
• 页数: 7页
• 分类号: TQ460.6
• 字数: 5559字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13506/j.cnki.jpr.2019.06.007

摘要

目的 本文利用星点设计-效应面法优化复合酶解酪蛋白制备抗凝血肽的工艺条件,并测定其体外抗凝血活性与溶栓效果.方法 首先运用星点设计-效应面法来确定菠萝蛋白酶、胰蛋白酶、胰糜蛋白酶和木瓜蛋白酶这4种酶各自酶解酪蛋白的最佳反应条件,然后在各酶的最佳反应条件下对酪蛋白进行复合酶解,制得酪蛋白复合酶解液,再运用凝血酶滴定改进法来测定其体外抗凝血活性,并用抗凝血活性最高的酪蛋白复合酶解液进行体外溶栓实验.结果 4种酶酶解酪蛋白的最佳反应条件分别如下:菠萝蛋白酶:pH为6.50、温度为60.00℃、酶用量为12000.00 U/(g底物)、时间为3.00 h、料水比为1:7(m/V);胰蛋白酶和胰糜蛋白酶均为:pH为8.00、温度为50.00℃、酶用量为6000.00 U/(g底物)、时间为3.00 h、料水比为1:7(m/V);木瓜蛋白酶:pH为6.50、温度为60.00℃、酶用量为4000.00 U/(g底物)、时间为3.00 h、料水比为1:7(m/V).结论 本实验条件下,加酶组合为"菠萝蛋白酶-胰蛋白酶-胰糜蛋白酶-木瓜蛋白酶"的复合酶解制备的酪蛋白酶解液具有最高的体外抗凝血活性,为100.0 ATU?mL-1;新西兰大白兔的血栓线用100.0 ATU?mL-1的酶解液浸泡24 h后全部溶解,且兔血与100.0 ATU?mL-1酪蛋白酶解液的比例(V/V)为1:1和4:6的样品组放置48 h仍不凝固.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张兆霞	广东海洋大学化学与环境学院	31	101	6.0	8.0
2	陈绍红	广东海洋大学食品科技学院现代生物化学实验中心	48	146	7.0	11.0
3	苗艳丽	广东海洋大学化学与环境学院	38	204	9.0	12.0
4	吴雄	广东海洋大学化学与环境学院	1	0	0.0	0.0
5	夏建开	广东海洋大学化学与环境学院	1	0	0.0	0.0
6	郭婉婷	广东海洋大学化学与环境学院	1	0	0.0	0.0
7	李棂灵	广东海洋大学化学与环境学院	1	0	0.0	0.0