重组人SOD1/3转基因山羊的制备及表达产物的检测

• 作者: 严坤宁 卢瑶瑶 周敏雅 张婷 成勇 袁婷婷 袁玉国 陆睿
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 重组人超氧化物歧化酶 乳腺特异性表达 转基因山羊 共表达
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 85-92
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2018-0877

摘要

设计了以hSOD1、hSOD3为编码序列,以山羊β-酪蛋白/CMV杂合启动增强子构建乳腺特异性表达载体rhSOD1、rhSOD3,共转染母山羊胎儿成纤维细胞,采用PCR和扩增产物序列分析筛选获得SOD1/3克隆细胞株,应用体细胞核移植(SCNT)制备双转基因山羊.出生小羊经PCR和扩增产物序列分析验证是否成功整合外源基因,经Western blotting、ELISA及体外活性检来验证分析表达产物.结果 表明:获得SOD1/3转基因山羊胎儿成纤维细胞系6株;原代双转基因体克隆山羊1只(♀);从该转基因羊乳汁中检测到rhSOD1、rhSOD3,浓度分别为:88.81±8.36 mg/L和267.82±12.67 mg/L;转基因羊乳汁中重组人SOD酶活性为1 432±157 U/mL.研究表明,以双裁体和单标记基因转染山羊胎儿成纤维细胞可获得双基因整合转基因细胞系,并且以SOD1与SOD3功能基因均可在山羊乳腺中共同表达,表达产物具有较好的生物学活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	成勇	扬州大学兽医学院	35	145	8.0	9.0
2	陆睿	扬州大学兽医学院	8	4	1.0	1.0
3	袁玉国	扬州大学兽医学院	9	39	2.0	6.0
4	袁婷婷	扬州大学医学院	5	4	1.0	1.0
5	张婷	扬州大学兽医学院	18	45	3.0	6.0
6	卢瑶瑶	扬州大学医学院	4	1	1.0	1.0
7	严坤宁	扬州大学医学院	2	0	0.0	0.0
8	周敏雅	扬州大学兽医学院	1	0	0.0	0.0