间接竞争酶联免疫吸附测定水产品中的组胺残留

• 作者: 刘波 袁利鹏
• 来源期刊: 现代食品科技
• 关键词: 组胺 N-酰化 酶联免疫吸附测定 水产品
• 年，卷（期）: 2019,（7）
• 所属期刊栏目: 食品安全与检测
• 页码范围: 291-295
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2019.7.041

摘要

本文通过制备特异性识别组胺衍生物的多克隆抗体,建立了针对水产品中组胺的间接竞争酶联免疫吸附分析方法(ic-ELISA).以组胺等为反应原料经三步化学反应合成组胺半抗原,采用活泼酯法将组胺半抗原分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联作为包被原和免疫原,用紫外扫描法进行鉴定,结果显示组胺半抗原与载体蛋白偶联成功.通过免疫新西兰大白兔制备组胺抗血清,采用辛酸-石硫酸铵方法纯化血清获得了相应的特异性多克隆抗体.通过对icELISA系列反应条件的摸索,确定了各组分的最适工作条件.试验结果表明:该方法对于组胺的IC50为0.91 ng/mL,与组氨酸、N-酰基组氨酸、3-甲基组胺等多种类似物及其衍生物均无交叉反应,方法特异性良好;线性检测范围为0.1～8.1 ng/mL,检出限为0.10 ng/mL;按照10、20、30 ng/g的添加量添加组胺至鱼、虾和贝类样品中,测得其回收率为98.9％～130.1％.方法 检测的准确性好灵敏度高,适用于实际水产样品中组胺的检测.