分泌型表达EDA-EmIMP1的重组枯草芽胞杆菌的构建及其免疫原性研究

• 作者: 丁可欣 李元凯 林霞琳 殷光文 陈志 黄志坚
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 枯草芽胞杆菌 分泌型蛋白 EDA佐剂 EmIMP1 巨型艾美耳球虫
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 199-205
• 页数: 7页
• 分类号: S852.616
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0005

摘要

枯草芽胞杆菌有着异源蛋白表达系统,纤维连接蛋白外域A(EDA)是一种能够提高相关蛋白的抗原性的佐剂,为了增强巨型艾美耳球虫的免疫相关蛋白1(IMP1)的抗原性,笔者对枯草芽胞杆菌分泌表达载体作为EDA分子佐剂重组亚单位疫苗的递呈载体的功能进行了研究,构建质粒pHT43-EDA-EmIMP1和pHT43-EmIMP1,将获得的重组质粒转化到枯草芽胞杆菌感受态中.将该重组菌对鸡饲喂,进行免疫学试验并做免疫效果评价.结果 显示,该重组枯草芽胞杆菌可以成功表达目的蛋白,蛋白大小为70 ku.ELISA检测EDA组的效价最高,其滴度在3 200左右;三免EDA组的IFN-γ浓度显著高于其他组(P＜0.05);三免EDA组和EmIMP1组的IL-12/70浓度显著高于PBS组(P＜0.05);CD4+T细胞群的检测显示,EDA组的CD4+T细胞群比例显著高于枯草芽胞杆菌组和PBS组(P＜0.05);EDA组、枯草芽胞杆菌组和EmIMP1组的卵囊排出量都显著低于攻虫组(P＜0.05);病变计分可以看出,EDA组对肠道保护效果显著优于除空白组外的其他组(P＜0.05).以上各项免疫学指标表明,枯草芽胞杆菌分泌型表达载体作为EmIMP1的抗原递呈载体可以有效提高免疫原性,其中EDA佐剂组的免疫效果最好.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄志坚		72	673	15.0	24.0
2	殷光文		27	29	3.0	4.0
3	陈志		8	4	1.0	1.0
4	丁可欣		2	0	0.0	0.0
5	林霞琳		3	0	0.0	0.0
6	李元凯		4	0	0.0	0.0