茶树CsPNPO基因的功能鉴定与表达分析

• 作者: 夏莹 张剑韵 陈星星 黄龙全
• 来源期刊: 西北植物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 茶树 功能鉴定 逆境胁迫 组织特异性
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 580-587
• 页数: 8页
• 分类号: Q785|Q786|S571.1
• 字数: 5189字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7606/j.issn.1000-4025.2019.04.0580

摘要

PNP氧化酶是VB6代谢途径中一个重要的转化酶.该研究以茶树‘龙井43'为材料,采用RT-pCR方法克隆PNP氧化酶基因,以pET22b(+)为载体构建原核表达载体,通过IPTG进行诱导表达并进行功能鉴定;采用荧光定量PCR方法分析茶树不同组织中CsPNPO基因的表达差异以及在低温和干旱胁迫下的表达特征,为进一步解析茶树VB6的生理生化功能奠定基础.结果 表明:(1)茶树CsPNPO编码框长度为1 503 bp,编码501个氨基酸,分子量为48.5 kD,理论等电点5.82,不含信号肽,属于亲水性的非分泌蛋白,定位于叶绿体;氨基酸序列分析结果显示,其有叶绿体转运肽区域、YjeF-N功能域和PNP氧化酶功能域.(2)成功构建pET22b(+)-CsPNPO原核表达载体,并在pH8.5、37℃时测定重组蛋白有较强的PNP氧化酶活性.(3)荧光定量PCR检测结果显示,CsPNPO基因在茶树叶中的表达量最高,其次是茎,根的表达量最低仅为叶的十分之一,表明CsPNPO基因具有组织表达特异性;在低温和干旱条件下CsPNPO基因的表达量下降明显,推测CsPNPO基因可能参与了茶树对低温和干旱的逆境应答.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张剑韵	安徽农业大学外国语学院	36	305	11.0	16.0
2	黄龙全	安徽农业大学茶与食品科技学院	37	305	11.0	16.0
3	陈星星	安徽农业大学茶与食品科技学院	2	0	0.0	0.0
4	夏莹	安徽农业大学茶与食品科技学院	2	0	0.0	0.0