多杀性巴氏杆菌转铁结合蛋白TbpA的原核表达及免疫原性

• 作者: 吴斌 张洪峰 彭忠 梁婉 王斐 陈焕春
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牛源A型多杀性巴氏杆菌 转铁结合蛋白 克隆表达 小鼠
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 人兽共患病
• 页码范围: 1151-1156
• 页数: 6页
• 分类号: S852.61|R535
• 字数: 4364字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.06.19

摘要

为研究多杀性巴氏杆菌转铁结合蛋白TbpA的免疫原性,本试验利用PCR从牛源A型多杀性巴氏杆菌HB01基因组中扩增了TbpA的编码基因tbpA,并将其克隆至原核表达载体pET-30α(+)上,转化至大肠杆菌BL21中进行诱导表达.SDS-PAGE检测结果显示,rTbpA蛋白成功表达.Western blot证实该蛋白能够与抗多杀性巴氏杆菌HB01血清发生阳性反应.将rTbpA免疫小鼠后,分别于免疫后14,28 d采血,利用ELISA试验检测血清中的抗体滴度,结果显示血清中的抗rTbpA蛋白的IgG抗体显著升高(P＜0.05).感染试验结果显示,免疫rTbpA蛋白能够保护70％的小鼠抵抗多杀性巴氏杆菌的致死性攻击,并且病理切片结果表明,免疫小鼠的肺部损伤相对于对照组小鼠显著降低.本试验为筛选新型的多杀性巴氏杆菌免疫原性蛋白提供依据.