小反刍兽疫病毒N蛋白原核表达条件的优化及反应活性

• 作者: 夏俊 李金娜 汪萍 沙依兰·卡依扎 王延 米晓云 苗书魁 陆桂丽 马文戈 魏婕 魏玉荣 黄炯
• 来源期刊: 中国微生态学杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 小反刍兽疫病毒 N蛋白 原核表达 反应活性
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 30-34
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65+9.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.13381/j.cnki.cjm.201901007

摘要

目的 探讨小反刍兽疫病毒(Peste des Petits Ruminants Virus,PPRV)N蛋白原核表达、条件优化及反应活性.方法 参照GenBank中PPRV (Nigeria/75/1)N基因序列,人工合成该基因,构建重组表达质粒pET-30a(+)-N,转化至BL21 (DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE电泳、Western-blot分析.在不同温度、时间、IPTG浓度条件下诱导表达N蛋白,确定最佳表达条件.结果 PPRV N蛋白(64.4 kD)成功表达,能被羊PPRV免疫血清所识别.N蛋白主要以包涵体存在,其最佳诱导条件:诱导温度28℃、IPTG终浓度2.0 mmol/L、诱导时间16 h.结论 原核表达的PPRVN蛋白具有良好的特异性和反应活性,为单克隆抗体的制备及快速诊断方法的建立提供了技术资料.