单纯性圆锥动脉干畸形患儿GATA-6基因突变筛查及突变体蛋白功能研究

• 作者: 吴悦 张阳 汪希珂 王予川 田颖 韦海涛
• 来源期刊: 中华实用儿科临床杂志
• 关键词: 单纯性圆锥动脉干畸形 转录因子GATA-6 基因突变 质粒 报告基因
• 年，卷（期）: 2019,（19）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1480-1484
• 页数: 5页
• 字数: 4273字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-428X.2019.19.011

摘要

目的 探讨转录因子GATA-6在单纯性圆锥动脉干畸形中的分子遗传机制,旨在为单纯性圆锥动脉干畸形的早期预防及遗传咨询提供支持.方法 选取32例散发单纯性圆锥动脉干畸形患儿及100例健康者,应用聚合酶链反应(PCR)方法扩增转录因子GATA-6基因的7个外显子编码区及两侧部分内含子区,PCR产物纯化后ABI Genetic Analyzer 3100型DNA测序仪自动测序,所得结果与美国国立生物技术信息中心(NCBI)数据库中GATA-6基因序列进行比对,并且与健康对照组比较,观察转录因子GATA-6基因突变情况;以野生型pcDNA3.1-GATA-6为模板,用基因定点突变方法构建突变基因型真核表达载体GATA-6-G245R;野生型GATA-6、GATA-6-G245R和心房利钠因子荧光素酶(ANF luciferase)报告质粒共转染HEK 293T细胞,并以共转染的CMV-LacZ为内参,荧光素酶和半乳糖苷酶活性在转染24 h后用发光计测定并检测下游ANF-Luciferase 报告基因的活性.结果 在1例右心室双出口患儿中发现了转录因子GATA-6的错义突变,突变位于GATA-6基因第2外显子区c.733G＞C,突变使第245位的甘氨酸(Gly)被精氨酸(Arg)取代(p.Gly245 Arg,G245R).pcDNA3.1(+)-GATA-6突变体真核表达质粒经酶切及正反2个方向测序验证构建成功;通过对luciferase荧光素酶报告基因活性的检测发现相比较野生型GATA-6和GATA-6-G245R突变基因转录活性下降.GATA-6-G245R与野生型GATA-6比较下降41.3％,二者比较差异有统计学意义(P ＜0.001).结论 转录因子GATA-6突变与单纯性圆锥动脉干畸形发生相关,转录因子GATA-6基因可能是单纯性心脏圆锥动脉干畸形患者的易感基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王予川	贵州省人民医院儿童心血管科	73	334	10.0	13.0
2	吴悦	贵州省人民医院儿童心血管科	26	115	7.0	10.0
3	张阳	贵州省人民医院儿童心血管科	5	4	1.0	2.0
4	田颖	贵州省人民医院儿童心血管科	12	55	4.0	7.0
5	汪希珂	贵州省人民医院儿童心血管科	16	24	2.0	4.0
6	韦海涛	贵州省人民医院儿童心血管科	8	14	2.0	3.0