重组猪 α干扰素工程菌的诱导表达及产物纯化

• 作者: 张莉 栗俞程 沈继朵 王聪
• 来源期刊: 江苏农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪α干扰素 工程菌 诱导表达 包涵体 纯化
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医与水产蚕桑
• 页码范围: 214-218
• 页数: 5页
• 分类号: S188
• 字数: 5177字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15889/j.issn.1002-1302.2019.09.050

摘要

为获得大量猪 α干扰素的重组蛋白,研究了其发酵条件,并对目的蛋白进行分离纯化.考察了不同IPTG诱导浓度(0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.5 mmol/L)、不同诱导温度(17、27、32、37℃)、不同诱导时间(0、2、3、4、5、6、7、8 h)对目的蛋白表达的影响;同时对包涵体进行提取、溶解变性进行研究,最后采用Ni柱亲和层析纯化目的蛋白.采用SDS-PAGE电泳及Image Pro Plus 6.0软件分析电泳结果,结果显示,IPTG诱导浓度为1.0 mmol/L、诱导温度为27℃、诱导时间为6 h时,目的蛋白表达量最多;超声波破碎细菌的最优时长循环为10 s/10 s;8 mol/L尿素溶解包涵体过夜可得到大量可溶性目的蛋白含量,Ni柱亲和层析后可去除大量杂蛋白,获得较纯的目的蛋白.可见本试验通过优化重组猪 α干扰素诱导表达条件及纯化方法,获得了高表达、高纯度的重组猪 α干扰素蛋白,为今后研究其生物活性奠定了初步基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	栗俞程	河南中医药大学科研实验中心	28	88	5.0	8.0
3	张莉	河南中医药大学药学院	9	39	3.0	6.0
4	王聪	河南中医药大学药学院	3	0	0.0	0.0
5	沈继朵	河南中医药大学药学院	15	43	3.0	6.0